实验动物的生理病理检测.ppt

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1、实验动物的生理病理检测实验动物的生理病理检测 第一节第一节 一般体征的检查与测量方法一般体征的检查与测量方法 一、一、体重的测量方法体重的测量方法动物体重借助称量仪器测量动物体重借助称量仪器测量 小鼠、大鼠：称重可用带游码的普通天平或电 子秤称重。兔、豚鼠：可直接放在婴儿秤上称重，从婴儿 秤圆形刻度盘上读取动物体重。犬：经训练后可直接放在磅秤上称重。未经驯 服的犬，先将犬嘴绑好，由实验员把犬抱 起站在磅秤上称重，记下读数，减去实验 员体重，即为动物体重。二、体温的测定方法 动物体温测定是动物实验中最常用的检测指标之一。动物体温测定是动物实验中最常用的检测指标之一。在测定前应先固定好动物。一般测

2、大鼠或小鼠体温时，左手带上布手套，将鼠抓起，并将鼠固定于实验者手心，同时用环指和小指把鼠尾固定；兔则可用左臂夹住兔体，左手提起尾巴，犬可固定在台上，然后右手持头瑞涂上少许凡士林的肛表，由肛门插入直肠一定深度。测量时间3min。测定体温除了用肛表外，还可用半导体点温度计可立即从温度表上读取温度数。各种成年动物的正常体温各种成年动物的正常体温动物种类体温变动范围（）平均体温（）动物种类体温变动范围（）平均体温（）猿猴 38.3-38.9 38.6大鼠 38.5-39.539.0犬38.5-39.5 39.0小鼠 37.0-39.038.0猫38.0-39.5 38.7鸡41.6-41.841.7兔

3、38.5-39.5 39.0鸽41.5-42.542.0豚鼠 37.8-39.5 38.6猪38.0-40.039.0三、脉搏的检查方法 检查脉搏较为重要，可以根据脉搏频率和性质，判检查脉搏较为重要，可以根据脉搏频率和性质，判断动物心脏和血液循环状态以诊断动物的疾病及判定断动物心脏和血液循环状态以诊断动物的疾病及判定其预后。其预后。检查犬、猫、兔等较大动物的脉搏时，先将动物略加固定，待其安静后，用右手伸入动物股部内侧，食指和中指压于血管上左右滑动，可感觉到血管象富有弹性的橡皮管在指下滑动。按脉的大小、强弱和软硬，分别施以轻压、中压和重压，体会脉搏的性质和节律。小动物的脉搏可直接在动物左侧胸部用

4、手触及心跳最明显处，计数一定时间，算出每分钟心跳次数。四、呼吸频率的测定方法 动物呼吸频率和呼吸深度的改变是实验时常见的动物呼吸频率和呼吸深度的改变是实验时常见的症状之一，对阐明药物作用的机制具有重要意义。症状之一，对阐明药物作用的机制具有重要意义。因此在实验前后必须注意检查动物的呼吸节律、因此在实验前后必须注意检查动物的呼吸节律、频率、深度的变化。这些变化可标志出呼吸器官的功频率、深度的变化。这些变化可标志出呼吸器官的功能状态。频而表浅的呼吸是肺通气量不足的症状。能状态。频而表浅的呼吸是肺通气量不足的症状。动物呼吸频率的测定方法十分简单：首先使动物动物呼吸频率的测定方法十分简单：首先使动物处

5、于相对安静状态，以肉眼观察并记录呼吸的次数，处于相对安静状态，以肉眼观察并记录呼吸的次数，一般要求记录一般要求记录1min的呼吸次数。的呼吸次数。第二节第二节 血液及造血功能常用血液及造血功能常用 指标的检查方法指标的检查方法一、血液常用指标的检查（一）红细胞计数（一）红细胞计数 动物红细胞计数可用普通的血细胞计数器，也可用光电比浊法。方法（试管法）：方法（试管法）：用血红蛋白吸管吸取静脉血20mm3，挤入盛有4mL红细胞 稀释液的华氏小试管中摇匀，滴入计数池，静置3min，在高 倍镜下数中央大方格中的5个中方格中红细胞数量，相加，计算（5格的总和10000即为每1/2mm3 内的红细胞数）。

6、(二二)白细胞计数白细胞计数 与红细胞计数一样，可用普通的血细胞计数器，也可用电子血细胞计数机计数。计数方法：计数方法：用血红蛋白吸管吸取动物静脉血至20mm3处，立即挤入盛有0.4ml白细胞稀释液的小试管内，充分摇匀，将混悬液滴一小滴入计数池，静置3min，在低倍镜下数四角4个大方格的白细胞数，计算（4格白细胞总数 50=1mm3 的白细胞总数。(三三)白细胞分类计数白细胞分类计数 采血采血 推片推片 干燥干燥 染色染色 计数计数形态鉴别：（1）嗜中性粒细胞：）嗜中性粒细胞：10-12um，有嗜中性颗粒。（2）嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞：略大于嗜中性粒细胞，颗粒大，位于核外，粉红色，核明显，常

7、分两叶。（3）嗜碱性粒细胞：）嗜碱性粒细胞：略大于嗜中性粒细胞，颗粒粗大压在核上，呈紫色，核不明显。（4）淋巴细胞：）淋巴细胞：8-15um，一般圆的多，核偏一边，核染色质排列成斑块状，较致密。核与胞浆比例为9：1或8：2。胞浆呈浅蓝色，有时有灰青颗粒。核的形状以圆形最多。（5）单核细胞：）单核细胞：15-20um，胞浆浅淡，核肾形多有压迹核染色质疏松，核两端常切断胞浆。(四四)血小板计数血小板计数 计数方法：计数方法：(1)小试管内加血小板稀释液0.4mL，取动物静脉血20mm3，迅速挤于稀释液内，立即充分摇匀。(2)放置410min，待溶液呈透明红色，说明红细胞已经充分溶解，充分摇匀，取l

8、小滴加入计数池。(3)放置10一15min，待血小板完全下沉后，先将中央大方格移至低倍镜视野内，再转以高倍镜，数5个中方格内的血小板数。(4)血小板大小形态不一致，但均呈折光的发亮淡蓝色小点，大小约红细胞的1712，呈不规则圆形或长圆形。在计数时必须来回扭动显微镜微调，不要遗漏计数。(5)计算：5个中方格的总和l 000=1mm3血液的血小板数。(五五)血细胞比容容量及红细胞血细胞比容容量及红细胞 降率降率(血沉血沉)测定测定 1血细胞比容容量测定血细胞比容容量测定 常用Wintrobe测定法：测定时，以EDTA二钠作为抗凝剂，5mL静脉血加1滴EDTA二钠，以细而长的吸管吸取抗凝血，插入Wi

9、ntrobe管底部，自上而下轻轻地把血液注入至刻度10处，不能夹有气泡，在校准过的离心机内以3000rmin的速度离心30min，压紧的红细胞的高度(mm)即为血细胞比容容量数值，常以百分率表示。2红细胞沉降率的测定红细胞沉降率的测定 以干燥草酸钾和草酸铵或EDTA二钠作为抗凝剂，将抗凝血加入Wintrobe管内到刻度10处，垂直放置，记录1h红细胞沉降的毫米数。测定时应在2227之间的室温下进行。二、造血功能常用指标的检查 1骨骨髓髓细细胞胞计计数数 将小鼠颈椎脱位处死，取l根股骨，用10mL 3醋酸溶液冲出骨髓细胞，在血细胞计数器上计数4个大方格的细胞数，所得细胞数乘以2.5X100000

10、，即为l根股骨中骨髓有核细胞数。2骨骨髓髓细细胞胞分分类类 将小鼠解剖后，取l或2节胸骨作骨髓涂片，经甲醇固定后，用瑞氏或姬姆染液染色：分类计数500个骨髓有核细胞。3骨髓粒细胞分裂指数骨髓粒细胞分裂指数 小鼠腹腔注射0.1mL(50ug)秋水仙碱溶液，5h后，取作骨髓涂片，经甲醇固定，用瑞氏或姬姆染液染色，计数每1000个粒细胞中分裂的粒细胞数。4白细胞计数和分类白细胞计数和分类 切开小鼠腹股沟，切断股动脉，取0.02mL全血加在15.9mL的生理盐水中，加入0.1mL1%皂素溶解红细胞，利用电子血细胞计计数白细胞。同时取1滴全血作涂片，经甲醇固定后，用瑞氏或姬姆染液染色，分类计数100个白

11、细胞。5白白体体在在脾脾脏脏和和骨骨髓髓中中的的掺掺人人试试验验 每只小鼠腹腔注射含有59Fe的枸橼酸盐缓冲液0.2mL(pH6.1)，6h后取出脾脏和两根骰骨，分别置于玻璃胶布内，应用Fricarb 1700型定标器测定放射性强度。6白白体体在在周周围围血血细细胞胞中中的的掺掺人人试试验验 每只小鼠腹腔注入含有59Fe的枸橼酸盐缓冲液0.2mL(pH6.1)，3d后切开股动脉，取全血02mL滴人脱脂棉球内，用玻璃胶布包好后，测定放射性强度。73H胸胸腺腺嘧嘧啶啶核核苷苷的的掺掺人人试试验验 小鼠腹腔注入1mL3HTdR，2h后取出脾脏，用生理盐水冲出股骨和胫骨中的骨髓细胞，分别测定DNA含量

12、和放射性强度。8胸胸腺腺和和脾脾脏脏重重量量测测定定 动物活杀后取出脾脏和胸腺，用扭力天平称重，分别计算出占动物体重的百分比。脾脏占体重的百分比反映动物骨髓外造血功能，正常小鼠脾脏占体重的181左右。第三节第三节 血压的测定与记录方法血压的测定与记录方法 一、直接描记法 动动物物血血压压直直接接描描记记法法是是动动物物实实验验中中最最常常用用的的方方法法，将将套套管管直直接接插插入入动动物物动动脉脉或或静静脉脉内内，套套管管的的另另一一端端连连接接血血压压换换能能器器，血血压压换换能能器器并并与与生生理理记记录录仪仪相相连连。动动物物动动脉脉血血压压测测定定常常采采用用颈颈总总动动脉脉或或股股

13、动动脉脉。分分离离出出一一侧侧颈颈总总动动脉脉后后，用用缝缝线线将将动动脉脉离离心心端端扎扎紧紧，再再用用动动脉脉夹夹在在近近心心端端夹夹住住。在在近近扎扎线线处处下下方方，用用眼眼科科剪剪向向心心端端将将动动脉脉剪剪一一小小口口，将将预预先先充充满满抗抗凝凝剂剂的的换换能能器器插插管管从从剪剪口口向向心心方方向向插插入入颈颈总总动动脉脉，然然后后用用预预先先备备好好的的缝缝线线连连同同套套管管及及动动脉脉一一起起扎扎牢牢，并并固固定定于于动动物物体体上上。松松开开动动脉脉夹夹，动动脉脉压压力力信信号号由由换换能能器器转转换换变变为为电电信信号号后后输输入生理记录仪，描记入生理记录仪，描记出动

14、脉血压曲线。出动脉血压曲线。二、间接测压法 在慢性性实验进行长期反复的血压观察时，采用此种方法。（一）犬（一）犬1股动脉测压法股动脉测压法 测量方法基本同一般人体血压测量，但血压计的压力袋规格不同。2颈颈部部皮皮桥桥测测压压法法 狗的间接测压法多按 Von Leesum法将颈动脉引至皮瓣内，然后测量该动脉血压。皮桥手术后10一12d，皮桥变柔软，试诊时脉搏良好，即可进行测压。此时用一般听诊器可测知收缩压和舒张压。(二二)兔兔1颈颈部部皮皮桥桥测测压压法法 基本和狗一样。但兔皮瓣必须保留保留较多的皮下组织，以防止手术后皮瓣干枯。2腹主动脉测压法腹主动脉测压法 将兔背卧固定在手术台上，把血压计和橡

15、皮压力袋缠于兔的下腹部，松紧适当，与测人血压相同。（三）大鼠（三）大鼠 多用鼠尾动脉测压，也可用下肢动脉测压。第四节第四节 尿液与粪便的检查方法尿液与粪便的检查方法 一、尿液的检查方法 尿液的性状与组成，可反应机体的代谢情况。特别是泌尿系统本身的疾病，对尿液成分影响更大。尿液检查是泌尿系统疾病的诊断和观察疗效的重要方法。尿液的采集，参照实验动物各种体液收集方法。一般用清洁容器收集新鲜尿液，以晨尿为好，因晨尿浓度较高，易发现病理成分。作细菌培养时，应消毒外阴后留中段尿，必要时进行导尿。化学定量检查时，应收集24h全部尿液，并加入适当的防腐剂(按尿量的0.5一1加入甲苯)。1、尿量检查、尿量检查常

16、用实验动物的尿量见下表(1)尿量增多尿量增多 一昼夜尿量超过正常值范围，称为多尿。生理性尿量增多见于大量饮水或食含水分过多的蔬菜所致。病理性尿量增多，见于糖尿病、尿崩症等。(2)尿量减少尿量减少 一昼夜尿量少于正常值范围称少尿，见于急性肾炎、急性肾功能衰竭等。2尿色检查尿色检查 正常新鲜尿液多为黄色或淡黄色，尿的颜色多受食物或药物的影响。(1)血尿血尿 呈洗肉水样或混有血凝块。(2)血红蛋白尿血红蛋白尿 呈浓茶色或酱油色，镜检无红细胞，隐血试验为阳性。(3)胆红素尿胆红素尿 呈深黄色，振荡后泡沫亦呈黄色。(4)乳糜尿乳糜尿 为乳白色尿液，有时混有少量血液。3、尿酸碱试验、尿酸碱试验 正常一昼夜混合尿液呈弱酸性，pH值为5.48.4。食肉类动物尿液多呈酸性，素食类动物尿液可呈中性或弱碱性，在酸中毒、发热时，尿液可呈较强酸性，可用pH试纸测定。4、尿比密、尿比密 尿液比密与其中所含溶质的浓度成正比，一般用尿比密计进行测定，比密计上的刻度是以尿温在15时制定的，当被检尿温每增加3加0.00l，每减少3减0.001。大量饮水时尿量增加，其比密降低；体内缺水时，尿量减少，比密增高。5尿蛋白定性试